E. coliDNA连接酶和T4 DNA连接酶有什么区别呢？
1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶
DNA连接酶和E. coliDNA连接酶有什么区别？
1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶
为什么E. coliDNA连接酶可以连接DNA？
1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶
DNA连接酶和拓扑异构酶的催化都属于共价催化。（）
DNA连接酶和拓扑异构酶的催化都属于共价催化。（） A.正确 B.错误 正确答案：
DNA连接酶属于那种酶？氧化还原，水解，异构还是合成？
合成酶氧化还原酶是一类催化氧化还原反应的酶，可分为氧化酶和脱氢酶两类水解酶类催化水解反应异构酶催化各种同分异构体之间的相互转变，即分子集团内部的重新排列合成酶又叫连接酶，是催化有腺苷三磷酸（ATP）参加的合成反应，即由两种物质合成一种新物质的反应
DNA聚合酶， DNA解旋酶，DNA连接酶，限制酶，逆转录酶 的异同
DNA聚合酶是DNA在复制的时候用到的是以一条DNA为模板根据碱基互补配对原则从母链的3"端开始将子链从5‘端延伸到3"端DNA解旋酶顾名思义是解旋用的通过消耗ATP将螺旋的DNA双链分子解开DNA连接酶使用来连接的通过识别两个特定的碱基序列将这两个DNA分子连接形成一个DNA限制性核酸内切酶跟DNA连接酶是反着的通过识别一个DNA分子中的一个特定的碱基序列在这个碱基序列的一个特定位置断开形成两个DNA分子逆转录酶以RNA为模板合成DNA就比如艾滋病病毒在入侵T细胞后就要逆转录然后把DNA接到T细胞的染色体DNA上这几种酶中DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶、逆转录酶是作用在磷酸二酯键的都会根据碱基互补配对原则至于DNA解旋酶则比较好记题做多了就记住了
人体细胞内有没有DNA连接酶
正常情况下人体内是不应该有DNA连接酶的。但是……如果人体感染了某种携带有指导合成DNA连接酶的病毒，而这种病毒又是一种荣源性病毒（即可与人体细胞和平相处）的话，人体细胞内是有可能合成DNA连接酶的……
dna连接酶与dna聚合酶的异同点
DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口的酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-P与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。这种形式的连接过程，对于正常的DNA合成，损伤DNA的修复，以及遗传重组中DNA链的拼接等都是十分必要的。3.2 DNA聚合酶的共同性质是：①以脱氧核苷酸三磷酸为前体催化合成DNA；②需要模板和有引物提供3"－OH；③不能起始合成新的DNA链；④催化脱氧核苷酸三磷酸加到生长中的DNA链的3"-OH末端；⑤催化DNA合成的方向是5"→3"。所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性，都可以在3"－OH上加核苷酸使链延伸。分析两种酶的特性不难发现，DNA连接酶的作用在于封闭DNA链上的缺口，而DNA聚合酶主要在模板链和引物的作用下，合成互补链的作用，两者的使用范围不同。
DNA连接酶与DNA聚合酶的区别？
DNA聚合酶的作用是催化DNA的复制,即将原料脱氧核糖核苷酸 通过引物与模板链进行配对,合成新的DNA单链。DNA连接酶则是将两段分开的DNA链通过特定末端连接在一起。拓展资料DNA聚合酶DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。
dna连接酶与dna聚合酶是一回事吗？为什么
DNA连接酶与DNA聚合酶有形成方式、模板和用途三个区别：1、形成方式不同DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用，催化原来的dna进行复制，然后将原来的dna和复制以后的dna进行模板配对后，连接聚合在一起，就可以形成新的dna链。2、模板不同DNA连接酶不需要模板，因为DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。用DNA连接酶连接具互补粘性末端的DNA片段或是用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链。DNA聚合酶的结构是三磷酸腺苷。3、用途不同DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。DNA聚合酶在DNA复制中起做用，主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。参考资料：百度百科-DNA连接酶百度百科-DNA聚合酶
DNA连接酶怎么分类
（1）E·coli DNA连接酶，来源于大肠杆菌，可用于连接粘性末端；（2）T4DNA连接酶：来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率低。（3）热稳定的DNA连接酶（thermostableDNAligase），是从嗜热高温放线菌（Thermoactinomycesthermophilus）菌株中分离纯化的，一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶。
DNA聚合酶和DNA连接酶有什么区别？
DNA聚合酶用于DNA复制，连接两条DNA单链行成一条DNA双链，作用于碱基对间的氢键；DNA连接酶用于基因工程，将目的基因连在载体（一般为质粒）上，作用于两脱氧核糖核苷酸间的磷酸二脂键。
DNA连接酶和DNA聚合酶的作用结果和用途
DNA连接酶的作用是连接DNA链之间的磷酸二酯键，使其成为一个完整的DNA分子。例如在基因工程中可将运载体与目的基因相连接，形成重组DNA分子。DNA聚合酶的作用是在DNA复制时将单个的脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸长链。
连接DNA的酶是DNA连接酶，那么连接氢键的酶是什么酶？
在DNA复制中，连接氢键不需要任何酶。氢键能自动形成。当氢原子与氮原子靠近时，共用的电子对强烈地偏向氮原子一边，使氢原子带有部分正电荷，能再与另一个电负性高而半径较小的原子氮原子结合，形成氢键。
高中生物DNA聚合酶和DNA连接酶的区别
DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起连接作用,在基因工程中起作用. DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起做用. DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键. DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链;而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来.因此DNA连接酶不需要模板.
DNA连接酶的介绍
DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。
人体内有DNA连接酶？作用？
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA连接酶
DNA连接酶在人体中也有存在，不过并不是用来复制DNA从而进行细胞分裂的，人体细胞分裂所需的酶是DNA聚合酶。人体中的DNA连接酶是用来将入侵人体的外援细菌或病毒的DNA剪碎的，在没有外源细菌或病毒入侵时，DNA连接酶不发挥作用基因工程中的DNA连接酶大多取自于原核生物体内
DNA复制时要用什么酶？要用到DNA连接酶吗？
需要DNA解旋酶和DNA聚合酶， 也需要DNA连接酶的：人体的DNA为两条链。在复制时，双链分开，形成复制叉，像一个方向移动。双链DNA的方向相反。复制叉形成后，一条链的3"端朝向叉口，新复制的链则为5"向3"持续延伸。这点很容易理解。另一条链则是5"端朝向叉口，而新的DNA链只能以这条链的3"端为模板开始复制。所以只能等复制叉张开到一定程度后，露出足够多的模板，才能开始复制。但是这样复制出来的只有一小截。等下一段模板露出后，又复制一小截。这些小片段有个名字，叫冈崎片段。他们需要DNA连接酶连接在一起才能形成新的DNA链。细菌的DNA是环形的，没有冈崎片段。但是也要DNA连接酶把新合成的DNA连接成环形。 另外，还需要RNA引物酶来合成起始引物。
DNA连接酶
从理论上看，DNA连接酶不判断碱基是否互补，是可以连接你说的情况的，但是现实条件下，DNA连接酶要发挥其功能，在2个碱基之间行成磷酸二酯键，是要这2个碱基之间的距离达在酶的活性中心内的。你说的情况下，我理解有2种情况: 1.DNA连接酶需要连接的连接点处的剪辑不配对。例如：ATGC ATGCTACG AACG间断处需要连接。但是由于AA不配对，AC碱基不可能进入DNA连接酶活性中心，所以这个不可能。2。连接点碱基配对，但是整个黏性末端不完全配对。这个情况是可以连接的。
DNA连接酶跟DNA聚合酶跟RNA聚合酶有啥区别跟联系？详细点
DNA连接酶只能修补DNA双链中有一个小缺口的单链，也就是说，这个缺口的对面，DNA是完整的，不是断裂的。如果两条链在同一个地方断裂就是2条DNA了，这时连接酶没作用，当然，如果DNA上有不止一个小缺口，只要DNA双链还完整，DNA连接酶就可以进行修补。DNA聚合酶在DNA复制中期延长作用，根据另一条链按碱基互补不断延长DNA，而DNA复制中所出现的引物水解后留下的缺口，就由DNA连接酶来修补。RNA聚合酶和DNA聚合酶差不多，就是连接核糖核苷酸形成磷酸二酯键.在DNA复制中(合成引物)和转录中起作用。
dna复制需要DNA连接酶吗?
需要,需要DNA解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶
DNA连接酶主要包括（ ）和（ ）两类
您好，（1）E·coliDNA连接酶，来源于大肠杆菌，可用于连接粘性末端；（2）T4DNA连接酶：来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率低。（3）热稳定的DNA连接酶（thermostableDNAligase），是从嗜热高温放线菌（Thermoactinomycesthermophilus）菌株中分离纯化的，一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶。
dna连接酶到底是作用在磷酸二脂键还是氢键
dna连接酶到底是作用在磷酸二脂键，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。不必咬文嚼字，我们知道DNA连接酶是让DNA末端核苷酸上的游离磷酸基酯化形成磷酸二酯键就可以了。
DNA连接酶是指哪种连接酶？
一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶
DNA连接酶和T4 DNA连接酶的区别是什么？
1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶
DNA连接酶与DNA聚合酶的区别？
DNA连接酶与DNA聚合酶有形成方式、模板和用途三个区别：1、形成方式不同DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用，催化原来的dna进行复制，然后将原来的dna和复制以后的dna进行模板配对后，连接聚合在一起，就可以形成新的dna链。2、模板不同DNA连接酶不需要模板，因为DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。用DNA连接酶连接具互补粘性末端的DNA片段或是用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链。DNA聚合酶的结构是三磷酸腺苷。3、用途不同DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。DNA聚合酶在DNA复制中起做用，主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。参考资料：百度百科-DNA连接酶百度百科-DNA聚合酶
DNA连接酶和DNA聚合酶的作用点分别是哪里？
DNA连接酶作用在磷酸二酯键，DNA聚合酶作用在碱基之间的氢键上
dna聚合酶和dna连接酶的区别
DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。
DNA连接酶连接粘性末端的碱基对为什么是错的
氢键并不是依靠酶来形成的。碱基互补配对时自然会在碱基间形成氢键。DNA连接酶连接的是DNA片段，催化形成的是磷酸二酯键。所以你提供的说法错了。
DNA连接酶在DNA复制中的作用是（）
DNA连接酶在DNA复制中的作用是（） A.校正作用B.合成引物C.缝合缺口D.切除引物正确答案：C
DNA连接酶属于那种酶？氧化还原，水解，异构还是合成？
合成酶氧化还原酶是一类催化氧化还原反应的酶，可分为氧化酶和脱氢酶两类水解酶类催化水解反应异构酶催化各种同分异构体之间的相互转变，即分子集团内部的重新排列合成酶又叫连接酶，是催化有腺苷三磷酸（ATP）参加的合成反应，即由两种物质合成一种新物质的反应
DNA连接酶的作用到底是什么？
dna连接酶到底是作用在磷酸二脂键，借助atp或nad水解提供的能量催化dna链的5"-po4与另一dna链的3"-oh生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(t4dna连接酶除外)，而且必须是两条紧邻dna链才能被dna连接酶催化成磷酸二酯键。不必咬文嚼字，我们知道dna连接酶是让dna末端核苷酸上的游离磷酸基酯化形成磷酸二酯键就可以了。
DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？
网上有两种答案，天涯和百度还有很多地方。各不相同。下面这个比较赞同，但是我还是查查文献问问老师搞清楚了再回答你吧。: ) 请等等。 没有。 1、一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。 噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。 2、作用机制：DNA连接酶利用NAD或ATP中的能量催化两个核酸链之间形成磷酸二酯键。反应过程可分三步： (1)NAD 或ATP将其腺苷酰基转移到DNA连接酶的一个赖氨酸残基的ε—氨基上形成共价的酶-腺苷酸中间物，同时释放出烟酰胺单核苷酸(NMN)或焦磷酸。 (2)将酶-腺苷酸中间物上的腺苷酰基再转移到DNA的5"-磷酸基端，形成一个焦磷酰衍生物，即DNA-腺苷酸; (3)这个被激活的5"-磷酰基端可以和DNA的3"-OH端反应合成磷酸二酯键，同时释放出AMP。 DNA连接酶所催化的整个过程是可逆的。酶-腺苷酸中间物可以与NMN或PPi反应生成NDA或ATP及游离酶;DNA-腺苷酸也可以和NMN及游离酶作用重新生成NAD。该逆反应过程可以在AMP存在的情况下使共价闭环超螺旋DNA被连接酶催化，产生有缺口的DNA-腺苷酸，生成松弛的闭环DNA。
dna复制过程中为什么要dna连接酶
DNA复制时半保留复制，复制时两条链同时进行复制，但是每一条新合成的DNA都是从5‘-3"进行，所以有一条链是不连续的，是由形成冈崎片段形成小片段，另一条则是连续合成，所以在合成结束后要将冈崎片段用DNA连接酶连接起来形成完整的DNA双链。所以DNA连接酶是必需的，是连接冈崎片段用的。
dna连接酶和dna聚合酶的区别
1、作用不同DNA聚合酶以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA。DNA 连接酶分为两大类：一类是利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP 的DNA 连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD* 的DNA 连接酶。2、连接片段不同DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。3、模板不同DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。参考资料来源：百度百科-DNA聚合酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶
DNA连接酶作用
DNA连接酶的作用就是连接DNA分子。①在DNA复制过程当中，一条链是连续复制的，另一条链则是不连续复制的。首先形成一定大小的冈崎片段，然后再由DNA连接酶将冈崎片段连接起来，形成完整的DNA分子。②在基因工程当中，也用来将目的基因与载体连接起来，形成重组DNA分子。
如何理解DNA连接酶的作用特点
相关专题重组DNA技术工具酶 教科书的观点：DNA连接酶无特异性,其催化dna片段末端连接的情况分两种：(1)催化相同或互补的黏性末端连接;(2)催化同一种限制酶切割产生的平末端连接.两种情况下,末端的“拼接”都会形成“回文序列”. 然而,在基因工程的实际操作中,催化DNA片段末端连接的方法是非常灵活的.例如,当目的序列和载体上没有相同的 限制性内切酶 位点可供利用时,而用不同的限制性内切酶切割后的黏性末端不能互补结合,则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端,再用T4DNA连接酶连接,但平末端连接要比黏性末端连接的效率低得多. 由此可见,DNA连接酶可以催化两种不同限制酶切割产生的平末端连接,而两个平末端拼接后,并不是“回文序列”.结论：DNA连接酶催化两个末端连接形成的新序列并不都是“回文序列”.(注：回文序列双链DNA分子中一段旋转对称的核苷酸序列,即以对称轴为轴心旋转180°后呈对称状态,它是大多数限制性内切酶的识别位点.《中国百科大辞典》) 在构建基因表达载体时,最简单的重组方式就是在目的基因DNA的两端用两种不同的限制性酶进行酶切,产生两个不同的黏性末端.再用这两种限制酶对合适的载体进行酶切,也产生两个不同的粘性末端.酶切后的目的基因和载体,由于它们各自的两个末端不同,都不会发生自身环化.
DNA连接酶有哪些作用？
DNA连接酶：DNA连接酶可在两个寡核苷酸之间进行连接反应，同时必须与另一DNA链形成杂交体，相当于连接dsDNA中的缺口，反应在4565摄氏度条件下进行，需要NADsuperscript+superscript的参与。一般用于检测等位基因的变化和PCR扩增中是否引入寡核苷酸。
DNA连接酶
DNA连接酶在人体中也有存在，不过并不是用来复制DNA从而进行细胞分裂的，人体细胞分裂所需的酶是DNA聚合酶。人体中的DNA连接酶是用来将入侵人体的外援细菌或病毒的DNA剪碎的，在没有外源细菌或病毒入侵时，DNA连接酶不发挥作用基因工程中的DNA连接酶大多取自于原核生物体内
DNA连接酶
DNA连接酶在人体中也有存在，不过并不是用来复制DNA从而进行细胞分裂的，人体细胞分裂所需的酶是DNA聚合酶。人体中的DNA连接酶是用来将入侵人体的外援细菌或病毒的DNA剪碎的，在没有外源细菌或病毒入侵时，DNA连接酶不发挥作用基因工程中的DNA连接酶大多取自于原核生物体内
DNA连接酶的问题
1.DNA连接酶没有专一性，只要在一条DNA链的3"末端具有一个游离的羟基(一OH)，而在另一条DNA链的5"末端具有一个磷酸基(一P)的情况下，就能发挥其作用。2.不同黏性末端或者平末端能够用同一种DNA连接酶连接，但不是所有连接酶都可以做到这一点。比如T4噬菌体DNA连接酶，但连接平末端的双链DNA分子的反应速率要比黏性末端连接慢得多，低浓度PEG可提高平末端连接速率；大肠杆菌DNA连接酶只能催化互相匹配黏端的5"突出端与3"突出端的双链DNA之间的连接，不能催化双链DNA片段平末端之间的连接。3.也有一种连接酶可以做到特异性，即热稳定的DNA连接酶。它是一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶。使用此种DNA连接酶进行体外连接，便可明显降低形成非特异性连接产物的机率。 具体过程为：将热变性的DNA和与靶重复序列两条链之一互补的寡聚核苷酸在接近熔点的温度下杂交。然后加人热稳定的DNA连接酶共价连接那些没有间隙隔开的寡聚核苦酸。通过变性将连接产物与模板分开，结果产生单链DNA分子的混合物。
DNA聚合酶和DNA连接酶都是作用于磷酸二酯键，有何区别？
区别：DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用。DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用。在基因工程中起作用，同时DNA连接酶在DNA复制中也起作用，比如岗琦片段的连接。扩展资料：DNA聚合酶和DNA连接酶的比较（参考资料来源：《生物化学》第7版 人民卫生出版社）
dna连接酶和dna聚合酶的异同
dna连接酶和dna聚合酶的异同：dna连接酶是在两个dna片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与dna片段之间形成磷酸二酯键；dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的dna片段上，形成磷酸二酯键等。 一、dna连接酶和dna聚合酶的相同点 （1）它们的化学本质都是蛋白质； （2）dna连接酶和dna聚合酶均属于酶，具有酶的基本属性和特点； （3）dna连接酶和dna聚合酶均参与dna的复制、逆转录等过程。 二、dna连接酶和dna聚合酶的不同点 1、形成方式不同 dna连接酶是在两个dna片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与dna片段之间形成磷酸二酯键。dna连接酶都不能催化两条游离的dna链相连接。 dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的dna片段上，形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用，催化原来的dna进行复制，然后将原来的dna和复制以后的dna进行模板配对后，连接聚合在一起，就可以形成新的dna链。 2、模板不同 dna连接酶不需要模板，因为dna连接酶是将dna双链上的两个缺口同时连接起来。用dna连接酶连接具互补粘性末端的dna片段或是用T4dna连接酶直接将平末端的dna片段连接起来。 dna聚合酶是以一条dna链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的dna链。dna聚合酶的结构是三磷酸腺苷。 3、用途不同 dna连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。 dna聚合酶在dna复制中起做用，主要是连接dna片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
DNA聚合酶,DNA解旋酶,DNA水解酶,DNA连接酶的区别？
不同点在于它们催化的底物或反应不同 DNA聚合酶：在DNA复制时起作用，将多个脱氧核苷酸催化聚合为脱氧核苷酸链（也就是DNA单链），此时形成的化学键是磷酸二酯键。 DNA解旋酶：在DNA复制或转录时起作用，将DNA的双链解开，作用对象是氢键，使氢键断裂 DNA水解酶：在消化道或细胞内起作用，将DNA水解为脱氧核苷酸，作用对象是磷酸二酯键 DNA连接酶：在DNA修饰过程或基因工程中起作用，将两个DNA片段连接起来，此时形成的化学键是磷酸二酯键。
DNA连接酶与DNA聚合酶的功能及有什么区别？
dna聚合酶的作用是催化dna的复制，即将原料脱氧核糖核苷酸通过引物与模板链进行配对，合成新的dna单链。dna连接酶则是将两段分开的dna链通过特定末端连接在一起。希望对你有帮助。
dna复制需要DNA连接酶吗？
需要dna解旋酶和dna聚合酶，由于复制是是整条链完整的打开完整的合上，不要用的，dna连接酶是生物工程时，从中间的磷酸二酯键将dna切成两段，要修补dna才用的
DNA连接酶和DNA聚合酶的区别是什么 都是连接磷酸二酯键吗
是这个样子的。dna聚合酶不但有成键活性，还有外切活性，你说的dna聚合酶能将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3"末端的羟基上，形成磷酸二酯键，是正确的，但是，dna聚合酶的工作，只能由一段引物起始，这是必须的。通常，dna聚合酶是个庞大的复合体。他的复制dna的方向是3"末端到5"末端。而2条dna链是方向的，dna聚合酶开始复制，需要引物，一条链的合成是连续的，从3"末端到5"末端，但另一条链方向却和dna聚合酶合成方向相反。因此，另一条链是分段复制的。每一段，称为一个冈崎片段。简单的说，冈崎片与冈崎片之间的磷酸二酯键是不能由dna聚合酶产生，这个磷酸二酯键是dna连接酶完成。dna连接酶不但参与2个冈崎片间的磷酸二酯键形成，也参与dna损伤修复中的磷酸二酯键形成。dna连接酶和dna聚合酶都能在两dna片段之间形成磷酸二酯键，只是过程不一样，效果也不一样。
dna限制酶，dna解旋酶，dna连接酶分别是干什么的
DNA解旋酶用于双链复制时解开双链DNA限制酶用于切断DNA的磷酸二酯键，形成两个双链DNA连接酶用于将限制酶切断的两个双链重新连起来，形成一条双链
DNA连接酶和DNA聚合酶的区别是什么 都是连接磷酸二酯键吗？
DNA连接酶只能修补DNA双链中有一个小缺口的单链，也就是说，这个缺口的对面，DNA是完整的，不是断裂的。如果两条链在同一个地方断裂就是2条DNA了，这时连接酶没作用，当然，如果DNA上有不止一个小缺口，只要DNA双链还完整，DNA连接酶就可以进行修补。DNA聚合酶在DNA复制中期延长作用，根据另一条链按碱基互补不断延长DNA，而DNA复制中所出现的引物水解后留下的缺口，就由DNA连接酶来修补。RNA聚合酶和DNA聚合酶差不多，就是连接核糖核苷酸形成磷酸二酯键.在DNA复制中(合成引物)和转录中起作用。DNA连接酶：基因工程里，把切开的两段DNA连起来DNA聚合酶：DNA复制时，把单个的 脱氧核苷酸 连到正在合成的DNA链上RNA聚合酶：转录或RNA自我复制时，把核糖核苷酸连接到正在合成的RNA 链上。区别是：连接两段：(DNA1)＝＝＝＝＝ ＝＝＝＝＝＝(DNA2) ↑DNA连接酶把单个连到一段上：(脱氧核苷酸)- --------(DNA新单链) ↑DNA聚合酶把单个连到一段上：(核糖核苷酸)- --------(RNA新单链) ↑RNA聚合酶共同点是：都连接形成 3,5-磷酸二酯键
DNA连接酶和tRNA连接酶有什么不同？
1、作用不同E.coliDNA 连接酶是生物体内重要的酶，其所催化的反应在DNA 的复制和修复过程中起着重要的作用。T4-DNA连接酶即T4 DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。2、连接条件不同用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段；用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来；先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异，但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。扩展资料：粘性末端DNA片段的连接DNA连接酶最突出的特点是，它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用，形成重组的DNA分子。平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法，主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是，利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶，它能够将核苷酸（通过脱氧核苷三磷酸前体）加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA，以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混合物中，DNA分子的3′-OH末端将会出现单纯由腺嘌呤核苷酸组成的DNA单链延伸。这样的延伸片段，称之为poly（dA）尾巴。反过来，如果在反应混合物中加入的是dTTP，那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly（dT）尾巴。因此任何两条DNA分子，只要分别获得poly（dA）和poly（dT）尾巴，就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法（homopolymertail-joining），简称同聚物加尾法。衔接物连接法所谓衔接物（linker），是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成、具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。衔接物的5′-末端和待克隆的DNA片段的5′-末端，用多核苷酸激酶处理使之磷酸化，然后再通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来。接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和克隆载体分子，这样的结果使二者都产生出了彼此互补的粘性末端。于是我们便可以按照常规的粘性末端连接法，将待克隆的DNA片段同载体分子连接起来。DNA接头连接法DNA接头，是一类人工合成的一头具某种限制酶粘性末端另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接之后，便会使后者成为具粘性末端的新的DNA分子，而易于连接重组。实际使用时对DNA接头末端的化学结构进行必要的修饰与改造，可避免处在同一反应体系中的各个DNA接头分子的粘性末端之间发生彼此间的配对连接。参考资料来源：百度百科-DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-T4-DNA连接酶
Dna复制时需要dna连接酶吗
需要的,DNA复制时需要的酶有：DNA聚合酶 、引发酶——催化合成RNA引物、DNA聚合酶、DNA连接酶、拓扑异构酶、解链酶、单链结合蛋白
DNA复制一定要用到DNA连接酶吗？
别听他们乱讲，告诉你，体内复制要用的，如果体外PCR就不用为什么呢，因为体内复制时，由于半保留复制，DNA两个链不是一样合成的，一个前导链，一个滞后链，前导链一口气从头合成到头，滞后链要先合成冈崎片段，然后就要用到DNA连接酶把冈崎片段连接起来，才能成为一条完整的链
DNA连接酶催化的反应是（ ）
选 CDNA连接酶催化的反应是：相邻核苷酸之间磷酸二酯键的形成！A、B：氢键的形成，不需要DNA连接酶！DNA连接酶也没有这个作用！C ：两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接，要形成完整的DNA分子，缝隙之间的2个相邻脱氧核苷酸之间必须要形成磷酸二酯键，所以必须要有DNA连接酶的催化！所以D是错误的！
DNA连接酶是什么，和E. coliDNA连接酶有什么区别？
一、指代不同1、E.coliDNA连接酶：从大肠杆菌中获得的DNA连接酶。2、T4连接酶：一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。二、原理不同1、E.coliDNA连接酶：一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。2、T4连接酶：T4DNA连接酶与辅助因子ATP形成酶－AMP复合物。三、特点不同1、E.coliDNA连接酶：只连接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯键。只能连接具有互补配对粘性末端的双链，对平末端效果不佳。2、T4连接酶：分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。T4 DNA 连接酶是一单链多肽，分子量为68,000道尔顿，它能催化双链DNA上相邻的3ˊ羟基和5ˊ磷酸末断形成磷酸二脂键。参考资料来源：百度百科-T4DNA连接酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶
DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA解旋酶的区别和共同点及作用位置，作用方式
DNA连接酶DNA聚合酶DNA解旋酶作用时期基因工程DNA复制DNA复制作用位置两基因两核苷酸之间两核苷酸之间还有什么问题再问
为什么原核生物dna连接酶催化作用要nad+
DNA连接酶作用于DNA连接，酯键的形成，这是消耗能量的。NAD+是作为连接酶的辅酶，帮助其利用ATP分解供能。
什么是DNA连接酶
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA聚合酶与DNA连接酶有什么区别？
1、作用不同DNA聚合酶以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA。DNA 连接酶分为两大类：一类是利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP 的DNA 连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD* 的DNA 连接酶。2、连接片段不同DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。3、模板不同DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。参考资料来源：百度百科-DNA聚合酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶
DNA连接酶
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。特点肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60Ku，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。来自噬菌体的T4DNA连接酶 一般特点：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA连接酶主要包括（ ）和（ ）两类
DNA连接酶的作用是恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的磷酸二酯键。DNA连接酶包括E•coli DNA连接酶和T4DNA连接酶；其中E•coliDNA连接酶来自大肠杆菌，只“缝合”黏性末端，T4 DNA连接酶来自T4噬菌体，可“缝合”黏性末端和平末端。
dna连接酶的作用
DNA黏合酶（EC6.5.1.1），也称DNA连接酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，透过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiesterbond）来黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已，真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA黏合酶为主。如果我的回答对你有帮助~请点击【我回答下】的【选为满意回答】按钮！不懂可追问~~~如果有其他问题请鼠标放在我账号上点击【求助知友】按钮【水酉不悦】，向我提问~〓来自知道团队【数理化梦之队】〓祝学习进步。
dna连接酶连接的是什么键?
dna连接酶连接的是磷酸二酯键。DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用，DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用。dna连接酶的性质DNA连接酶连接的是被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而磷酸二酯键是连接单链DNA分子中相连脱氧核苷酸之间的化学键，DNA聚合酶和DNA连接酶都是形成磷酸二酯键，但两者不同之处是DNA聚合酶催化单个脱氧核酸聚合。且需要有模板而DNA连接酶是将两个DNA片段之间连接，通过DNA连接酶连接两种不同DNA分子片段之间的磷酸二酯键，其位置是磷酸与脱氧核糖之间，DNA连接酶DNALigase也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色。
DNA连接酶最初来自于哪里
现在医学和科研所用的DNA连接酶主要是从病毒（T4噬菌体）中分离得到的， 当然也有很多从原核生物（大肠杆菌）分离得到的。 但病毒，大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。 该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。
Dna复制时需要dna连接酶吗
Dna复制时需要dna连接酶DNA的复制事实上是半不连续复制 即只有一条链的合成是连续的 这听起来很神奇 但确实是这样 连续合成的链叫做前导链 另一条链称为后随链 它的合成是不连续的 以它为模板的合成 需要一段一段地进行 所合成的片段叫做冈崎片段产生这一现象的原因在于 DNA合成酶只能沿5"-3"的方向合成DNA 而DNA本身的两条链又是反向分布的 所以就造成了只有一条链合成可以连续地进行下去（以它为模板的子链生成方向正好是DNA聚合酶可以直接提供的） 而后随链要盘绕成回环 反扭过来 才能合成再合成起始的时候 DNA聚合酶是需要一段RNA引物的 在原核生物中这一引物是由dnaQ(一种酶)在已解旋的单链5"端合成，真核生物中也有对应的酶 由于后随链的合成不连续 所以每个片段都要有引物 在DNA合成结束的时候 这些引物要被切除 因而留下缺口 这时又要特定的酶去填补缺口（比如 大肠杆菌中的DNA聚合酶I）可是填补序列和周围序列间会有缺刻 也就是说他们交界处的3"-5"磷酸二脂键是断开的 这时需要DNA连接酶发挥作用 将其连好所以 后随链上的缺刻多 还真够DNA连接酶忙一阵的 前导链上只有一开始有RNA引物 因此 最后也基本只有这个地方会用到连接酶
了解DNA连接酶的作用特点有何使用价值?
作用特点：①不能连接两条单链DNA或环化DNA，只能连接双链DNA分子的单链缺口。②只能连接失去一个磷酸二酯键形成的单链断裂，不能连接缺失一个或多个氨基酸缺口③只作用于3端羟基和5端磷酸的链④连接反应需要ATPNAD+和Mg2+利用价值：可对缺口DNA，平末端DNA，黏性末端DNA进行连接。
DNA复制过程中为什么要DNA连接酶
DNA复制时半保留复制，复制时两条链同时进行复制，但是每一条新合成的DNA都是从5‘-3"进行，所以有一条链是不连续的，是由形成冈崎片段形成小片段，另一条则是连续合成，所以在合成结束后要将冈崎片段用DNA连接酶连接起来形成完整的DNA双链。所以DNA连接酶是必需的，是连接冈崎片段用的。
DNA连接酶和DNA聚合酶都是干什么用的，有什么区别
DNA聚合酶（DNApolymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶,以DNA为复制模板，从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为DNA聚合酶α（定位于胞核，参与复制引发具5－3外切酶活性），β（定位于核内，参与修复，具5－3外切酶活性），γ（定位于线粒体，参与线粒体复制具5－3和3－5外切活性），δ（定位核，参与复制，具有3－5和5－3外切活性），ε（定位于核，参与损伤修复，具有3－5和5－3外切活性）。原核细胞有3种DNA聚合酶，都与DNA链的延长有关。DNA聚合酶I是单链多肽，可催化单链或双链DNA的延长；DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关；DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多，是促进DNA链延长的主要酶。DNA连接酶连接酶旧称“合成酶”DNAligaseDNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。
DNA连接酶的作用是（）。
DNA连接酶的作用是（）。 A.复制时切断、理顺DNA链B.RNA引物去除后连接DNAC.解开DNA双螺旋D.连接相邻DNA链3"-OH和5"-P正确答案：连接相邻DNA链3"-OH和5"-P
DNA连接酶有特异性吗
DNA连接酶没有特异性,限制性内切酶有特异性.DNA连接酶连接的是磷酸二酯键.不是碱基之间的氢键.所以DNA连接酶没有特异性.(碱基之间的氢键不需要什么酶去连接,是自动连接的）。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。
人体细胞内有没有DNA连接酶。。
人体内是存在DNA连接酶的。因为人的DNA在复制时，由于半保留复制，DNA两个链不是一样合成的，一个前导链，一个滞后链，前导链一口气从头合成到头，滞后链要先合成冈崎片段，然后就要用到DNA连接酶把冈崎片段连接起来，才能成为一条完整的链。希望可以帮到你~~
DNA连接酶的作用
DNA黏合酶（EC 6.5.1.1），也称DNA连接酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，透过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiester bond）来黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已，真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA黏合酶为主。如果我的回答对你有帮助~ 请点击【我回答下】的【选为满意回答】按钮！不懂可追问~~~ 如果有其他问题请鼠标放在我账号上点击【求助知友】按钮【水酉不悦】 ，向我提问~ 〓来自知道团队【数理化梦之队】〓 祝学习进步
dna连接酶连接的是什么键?
dna连接酶连接的是磷酸二酯键。DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用，DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用。dna连接酶的性质DNA连接酶连接的是被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而磷酸二酯键是连接单链DNA分子中相连脱氧核苷酸之间的化学键，DNA聚合酶和DNA连接酶都是形成磷酸二酯键，但两者不同之处是DNA聚合酶催化单个脱氧核酸聚合。且需要有模板而DNA连接酶是将两个DNA片段之间连接，通过DNA连接酶连接两种不同DNA分子片段之间的磷酸二酯键，其位置是磷酸与脱氧核糖之间，DNA连接酶DNALigase也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色。
高中生物dna连接酶具有专一性么？？？是所有的还是？？？
可能很多同学混淆了“专一性”和“特异性”专一性是所有酶的特点，只要是酶就一定具有专一性，DNA连接酶属于酶，所以也具有专一性，具体体现在“只能连接脱氧核苷酸而不能连接核糖核苷酸”等方面。特异性。在DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶三者里，限制酶“可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对在每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割”，具有特异性；DNA连接酶“催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键”，不具有特异性，唯一的区别是，大肠杆菌连接酶只连接黏性末端，而T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端；DNA聚合酶将哪一种脱氧核苷酸聚合，是由模板链的碱基决定的，遵循碱基互补配对原则，不具有特异性。参考：百度百科“DNA连接酶”、《人教版高中生物选修3》
为什么DNA复制过程中需要DNA连接酶？？？求大神解惑、
DNA复制过程中需要DNA连接酶的原因：DNA连接酶可以连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。DNA连接酶也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸酯键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，通过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiester bond）来黏合DNA(DNA连接酶将DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸双脂键)。
如何理解DNA连接酶的作用特点
作用特点：①不能连接两条单链dna或环化dna，只能连接双链dna分子的单链缺口。②只能连接失去一个磷酸二酯键形成的单链断裂，不能连接缺失一个或多个氨基酸缺口③只作用于3端羟基和5端磷酸的链④连接反应需要atpnad+和mg2+利用价值：可对缺口dna，平末端dna，黏性末端dna进行连接。
DNA连接酶有什么作用？
能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。为将限制性酶切片段共价地连接起来，可使用T4DNA连接酶，或大肠杆菌连接酶。T4DNA连接酶是分子量58kD的多肽，是T4噬体感染大肠杆菌而产生的。在连接反应中以ATP为辅助因子，是应用最广的连接酶，有商品供应。它的用途是：①连接带匹配粘端的DNA分子，②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。大肠杆菌DNA连接酶能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接，反应中以NAD+作为辅助因子，基因工程不常用。
DNA连接酶的种类及区别?限制酶和DNA连接酶作用的化学键分别是什么?载体的条件是?（3点 ）
1. （1）E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端； （2）T4DNA连接酶：来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低. （3）热稳定的DNA连接酶（thermostableDNAligase）,是从嗜热高温放线菌（Thermoactinomycesthermophilus）菌株中分离纯化的,一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶. 2. DNA连接酶：连接DNA单链与DNA单链之间的磷酸二酯键 限制性核酸内切酶：剪切双链DNA内的磷酸二酯键 3. 作为运载体必须具有三个条件： ①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制； ②有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入； ③有一定的标记基因,便于进行筛选.如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因.一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建.现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的.
解旋酶，D N A聚合酶，DNA连接酶分别作用于什么部位
解旋酶作用的部位是双链DNA分子的氢键。DNA聚合酶，DNA连接酶作用部位都是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。解旋酶是一类解开氢键的酶，而不是一种酶，由水解ATP供给能量来解开DNA的酶。它们常常依赖于单链的存在，并能识别复制叉的单链结构。一般在DNA或RNA复制过程中起到催化双链DNA或RNA解旋的作用。DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD*的DNA连接酶。扩展资料：转录前先是TFⅡ-D与TATA盒结合;继而TFⅡ-B以其C端与TBP-DNA复合体结合，其N端则能与RNA聚合酶Ⅱ亲和结合;接着由两个亚基组成的TFⅡ-F加入装配，TFⅡ-F不仅能与RNA聚合酶形成复合体。还具有依赖于ATP供给能量的DNA解旋酶活性，能解开前方的DNA双螺旋，在转录链延伸中起作用。这样，启动子序列就与TFⅡ-D、B、F及RNA聚合酶Ⅱ结合形成一个有转录功能基础的“最低限度”转录前起始复合物(pre-initiationcomplex，PIC)，转录mRNA.。TFⅡ-H是多亚基蛋白复合体，具有依赖于ATP供给能量的DNA解旋酶活性，在转录链延伸中发挥作用;TFⅡ-E是两个亚基组成的四聚体，而可能与TFⅡ-B联系不直接与DNA结合，能提高ATP酶的活性;TFⅡ-E和TFⅡ-H的加入就形成了完整的转录复合体，能转录延伸生成长链RNA。聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令，即A与T，C与G的配对原则，逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端，逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用。3"→5""外切酶活性（校对作用）：这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用，当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。可见，3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性。大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部分活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。参考资料来源：百度百科-解旋酶百度百科-DNA聚合酶百度百科-DNA连接酶
DNA连接酶
DNA连接酶不可以连接两条单链的DNA。DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口的酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60Ku，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。